气相色谱检测果蔬中有机磷农药残留方法

材料与方法

1.2.1 试剂

丙酮；氯化钠；无水硫酸钠；农药标准品：农药标准储备液购于农业部环境保护科研监测所，敌敌畏：100 μg/mL；特丁硫磷：100 μg/mL；甲基硫环磷：

100 μg/mL；马拉硫磷：100 μg/mL；农药标准使用溶液：吸取敌敌畏等含量为100 μg/mL的有机磷标准储备液0.5 mL，置于10 mL容量瓶中，用丙酮定容，此溶液相當于5.0 μg/mL的有机磷标准液。

1.2.2 仪器

组织捣碎机；电动振荡器；旋转蒸发仪；Agilent7890B气相色谱仪：附有自动进样器和火焰光度检测器（FPD）。

1.2.3 方法

1.2.3.1 样品预处理

在采样和制备过程中，应注意不使样品污染；果蔬样品擦去表层泥水，按GB2763-2014《食品安全国家标准食品中农药最大残留量》的要求进行匀浆成待分析试样。

1.2.3.2 样品的提取与净化

称取25 g试样于300 mL烧杯中，加入50 mL水和100 mL丙酮（提取液总体积为150 mL），在电动振荡器上振荡2 min，过滤。滤液加入15 g氯化钠，剧烈振摇2 min，静置10 min，使丙酮从水相中盐析出来。吸取30 ml丙酮溶液，经无水硫酸钠漏斗过滤至浓缩瓶中，再以40 ml丙酮分次洗涤漏斗和无水硫酸钠，洗液也并入浓缩瓶中，用旋转蒸发仪浓缩至近干，用丙酮定容至5 mL，备用[4]。

2 NY/T761-2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》[5]法

2.1 方法原理

试样中有机磷类农药经乙腈提取，提取液经过滤，浓缩后用丙酮定容，浓缩液注入气相色谱仪，农药组分经毛细管柱分离，火焰光度检测器（FPD磷滤光片）检测。保留时间定性，外标法定量。

2.2 材料与方法

2.2.1 试剂

乙腈；丙酮；氯化钠；农药标准品和农药标准使用溶液：同1.2.1。

2.2.2 仪器

同1.2.2。

2.2.3 方法

2.2.3.1 样品预处理

同1.2.3.1。

2.2.3.2 样品的提取与净化

称取25 g试样于300 mL烧杯中，加入50 mL乙腈，在电动振荡器上振荡2 min，过滤。滤液收集到装有5 g氯化钠的具塞量筒中，剧烈振摇1 min，静置30 min，使乙腈相和水相分层。吸取10 mL乙腈溶液于100 mL烧杯中，80 ℃水浴氮吹近干，再用丙酮定容至5 mL，备用。

3 AOAC萃取法

3.1 方法原理

试样中有机磷类农药经提取净化后注入气相色谱仪，农药组分经毛细管柱分离，火焰光度检测器（FPD磷滤光片）检测。保留时间定性，外标法定量。

3.2 材料与方法

3.2.1 试剂

1%乙酸乙腈；丙酮；AOAC萃取填料；纯化管；农药标准品和农药标准使用溶液：同1.2.1。

3.2.2 仪器

同1.2.2。

3.2.3 方法

3.2.3.1 样品预处理

同1.2.3.1。

3.2.3.2 样品的提取与净化

称取15 g试样于离心管中，加入15 mL1%乙酸乙腈，在电动振荡器上振荡1 min，加入AOAC萃取填料（6 g硫酸镁和1.5 g乙酸钠），再振摇1 min，4 000 r/min离心5 min，将所有有机相转移到纯化管中，再剧烈振摇1 min，4 000 r/min离心3 min，取2 mL提取液氮吹近干，再用丙酮定容至2mL，备用。

4 标准溶液的配制

准确吸取敌敌畏等有机磷标准使用液各2 mL于50 mL容量瓶中，用丙酮定容。此標准使用液相当于0.2 μg/mL的有机磷混合标准液。另配成浓度为0l、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8μg/mL和1.0 μg/mL的混合标准溶液。

5 气相色谱测定

5.1 气相色谱条件

色谱柱：DB-1701 30 m×0.32 mm×0.25 μm石英弹性毛细管柱。

气体流速：高纯氮气（>99.999%）为载气，载气流速：3 mL/min；尾吹气60 mL/min；氢气60 mL/min；空气60 mL/min。

气化室温度：220 ℃；检测器温度：250 ℃；程序升温：起始温度80 ℃，恒温1 min，以30 ℃/min升至220 ℃，再以5 ℃/min升至250℃，恒温1 min。

5.2 色谱分析

取1μL标准溶液及试样净化液注入氣相色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰面积或峰高与标准比较定量。

5.3 结果计算

6 结论

6.1 实验结果

4种有机磷农药混合标准液在选定的色谱条件下得到良好的分离，整个分析过程仅需12 min，色谱峰的峰形及分离度都比较满意。标准色谱图见如图1所示。

6.2 线性范围及标准曲线

实验结果表明，敌敌畏、特丁硫磷、甲基硫环磷、马拉硫磷4种有机磷标准溶液在0.04～0.5 ng范围内有良好的线性关系，R2>0.995，见表1。

6.3 精密度实验

在样品中添加一定量的农药标准物质，分别按三种方法进行前处理，最后各浓缩液重复测定7次，方法一的变异系数C.V（%）在1.3%～2.8%；方法二的变异系数C.V（%）在0.5%～2.4%；方法三的变异系数C.V（%）在0.8%～2.2%，具体见表2。

6.4 准确度实验

先测出样品中各种农药残留量的本底值，然后加入适量的标准溶液，分别采用3种不同的前处理方法，测定其加标回收率。实验表明，方法一中敌敌畏、特丁硫磷、甲基硫环磷、马拉硫磷加标回收率在85.8%～91.7%；方法二中敌敌畏、特丁硫磷、甲基硫环磷、马拉硫磷加标回收率在86.7%～94.6%；方法三中敌敌畏、特丁硫磷、甲基硫环磷、马拉硫磷加标回收率在88.3%～92.9%。具体见表3。

6.5 方法讨论

本文探讨的3种前处理方法，对敌敌畏、特丁硫磷、甲基硫环磷、马拉硫磷4种有机磷的回收率都较好，是气相色谱检测的良好方法，但第三种方法的前处理操作更简单方便。相比较而言，丙酮具有亲脂、亲水的特性，毒性比乙腈小，但挥发性比乙腈高；乙腈极性大，作为提取溶剂时，除脂肪、蛋白、糖分、水分的效果比丙酮稍好，且色素等物质也相对要少一些。而使用1%乙酸乙腈能达到乙腈提取的效果，且其前处理操作更简单方便、安全。

参考文献

[1]李晓婷，王纪华，朱大洲，等.果蔬农药残留快速检测方法研究进展[J].农业工程学报，2011，27（s2 ：363-370.

[2]蔡晓霞，张再隆，梁世强，等.果蔬农药残留快速检测技术研究进展[J].粮油加工，2009（11）：105-109.

[3]中华人民共和国卫生部.GB/T5009.20-2003食品中有机磷农药残留量的测定[S].北京：中国标准出版社，2003.

[4]丁国允.蔬菜中多种农药残留快速检测方法研究及应用[D].中山：中山大学，2005.

[5]中华人民共和国农业部.NY/T761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S].北京：农业出版社，2008.

（责任编辑：赵中正）

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