卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤组织中的HE4表达以及同临床病理因素的关系研究

【摘要】目的：研究卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤组织中HE4表达和临床病理因素相关性。方法：选择2018年01月份-12月份入我院治疗的30例卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者20例良性卵巢肿瘤患者，采取免疫组化法检测，分析不同组织的卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤中的HE4的蛋白表达水平。结果：卵巢良性肿瘤患者中检测出HE4阳性的患者2例，阳性表达率是10.00%，卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者中检测出HE4阳性患者22例，阳性表达率为73.33%，卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者HE4阳性表达率明显比良性卵巢肿瘤阳性表达率高。结论：卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤组织中HE4表达与卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤病理因素存在联系，将来可以作为卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤早期诊断的肿瘤标记物，提高患者诊断准确率。

【关键词】卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤;HE4;临床病理

【中图分类号】R737.31 【文献识别码】B 【文章编号】1002-8714（2019）08-0043-01

卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤是生长于卵巢表面上皮的恶性肿瘤，早期患者临床症状缺乏特异性，此病极易被忽视，外加缺乏有效的筛查手段，因此早期诊断存在一定难度，大部分患者就诊时病情已处于晚期，而晚期预后一般不良。尽管卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤的发病率与宫颈癌、子宫内膜癌相比较低，但病死率远超过这两种疾病的病死率之和。据调查发现，近些年卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤的发病率逐年攀升，对妇女的身心健康构成了严重威胁。近几年，相关学者开始重视选择一种有效肿瘤的标记物，以便在卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤早期的诊断中应用。人附睾蛋白4（HE4），由附睾上皮远端分离所得，考虑和精子成熟度相关。文章选择2018年01月份-12月份人我院治疗的30例卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者，探讨了卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤组织中HE4表达和临床病理因素相关性，报告如下。

1资料与方法

1.1资料

选择2018年01月份-12月份入我院治疗的30例卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者20例良性卵巢肿瘤患者，采取免疫组化法检测。卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者参照组年龄43～77岁，平均（57.16±7.95）岁;病程3～14个月，平均（6.85±1.45）个月。卵巢肿瘤患者年龄（56.13±2.16）岁。病程2-13个月。纳入标准：所有患者均证实患有卵巢肿瘤，符合WHO相关诊断标准;能够耐受本次治疗，且配合度高;患者对本次研究知情，自愿签订同意书;本院伦理委员会已批准本次研究的进行。排除标准：肾、肝、心及血液检查明显异常;精神疾病、意识不清：未签署知情同意书。两类疾病患者基线资料对比缺乏显著的差异，P>0.05，可比较。

1.2方法

1.2.1检测试剂和设备

选择福州迈新生物技术开发有限公司兔抗人多克隆的抗体、S-P免疫组化试剂盒（通用型二步法试剂盒）、隔水式电热恒温培养箱、显微镜以及显微摄影的显微镜。

1.2.2检测方法

经10%福尔马林液将采集组织标本固定，经石蜡进行包埋，切蜡块为三张，厚度约为4-5μm，采取无水乙醇、二甲苯脱蜡进行脱水，置于60℃烤箱中超过2小时，1张用来染色，2张用来备用。经PBS（pH=7.4）对石蜡切片进行冲洗，冲洗三次，每次冲洗时间为3分钟，一张切片滴加滴过氧化氢酶抑制剂一滴，在室温条件下进行20分钟的孵育，把标本置于枸橼酸盐缓冲液之中，采取微波炉的高火进行10分钟加热，冷却以后采取PBS冲洗，冲洗干净之后，在每张切片滴加非免疫性动物的血清一滴，在室温条件下进行20分钟孵育，将多余血清吸取，滴人一抗，放置于4℃冰箱中一液。根据同种方式采取PBS进行两次冲洗，将生物素先后滴加，再标记。在室温下进行20-30分钟孵育，采取PBS冲洗，将PBS液去除，将DAB的溶液滴加到切片上，在显微镜下对标本观察，如果呈现棕黄色，说明染色为阳性。

1.3观察指标

①经二次计分方法评估HE4的表达情况，根据染色强度进行计分：无色表示为0分，淡黄色表示为1分，棕黄色表示为2分，棕褐色表示为3分。根据阳性细胞的百分比进行计算，阳性细胞数为零时计为0分;0<阳性细胞数<11%表示为1分：11%≤阳性细胞数≤50%表示为2分;50%<阳性细胞数≤75%表示为3分;阳性细胞数>75%表示为4分。以上两项积分当作最终评分的标准，结果超过2分为阳性，结果在2分及以下表示为阴性。②HE4的表达结果和卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤的患者病理因素相关性。

1.4统计学方法

我院本次开展的研究所得数据将全部带入到SPSS 17.0统计学软件当中进行分析。对于计量资料，以x±s呈现，并通过t值结果检验;对于计数资料，以%呈现，并通过x²值结果检验。最终以P值衡量两组数据之间的差异程度，如果P<0.05则说明差异显著。

2结果

卵巢良性肿瘤患者中检测出HF4阳性的患者2例，阳性表达率是10.00%，卵巢表面上皮一间质恶性肿瘤患者中檢测出HE4阳性患者22例，阳性表达率为73.33%，卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者HF4阳性表达率明显比良性卵巢肿瘤阳性表达率高。

3讨论

卵巢表面上皮一间质恶性肿瘤为女性生殖器恶性肿瘤之一，其病因也不明确，可能与遗传因素、内分泌因素有关。HF4基因为WAP的基因家族，目前，HF4生物学的功能还没有明确，相关研究中指出，HE4转录从翻译起始的密码子ATG上游-28位C开始，转录活性经-71、-48的Egr-1位点以及Sp1转录因子介导，将来，HF4会被证实为一种高特异性、灵敏l生卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤的标志物，给卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤治疗打开新的天地。有资料表明，在非卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤的恶性肿瘤之中HE4呈现出不表达或是低表达，而良性卵巢肿瘤中有部分表达。有学者在个人研究指出，晚期卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤的患者组织之中HE4表达水平比早期患者高，如果患者存在淋巴结转移，其阳性表达率比没有转移的患者高，能够将卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者病理的发展进程展现出来。本次研究得出，卵巢良性肿瘤患者中检测出HE4阳性的患者2例，阳性表达率是10.00%，卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者中检测出HE4阳性患者22例，阳性表达率为73.33%，卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者HE4阳性表达率明显比良性卵巢肿瘤阳性表达率高。

综上，卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤组织中HE4表达考虑可作为卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤患者早期诊断的肿瘤标记物，经该物质分析患者是否患有卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤，提高卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤早期确诊率，继而为临床治疗提供依据，将卵巢表面上皮-间质恶性肿瘤诊治效果提高。

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