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1.1 材料
参试花斑副沙鳅为长江上游鱼类资源保护与利用四川省重点实验室人工繁殖个体，取全长130～159 mm、体长110～135 mm、体质量13.9～26.5 g、体格健壮、体表无伤个体30尾用于试验。取样前清水中停饵暂养1 d。
1.2 方法
1.2.1 样品制备 花斑副沙鳅断鳃断尾放血，冰浴条件下迅速摘取鰓、心、肝胰脏、肠、肾、肌肉、眼、脑8种组织，滤纸吸去血渍，预冷生理盐水清洗组织，以样品∶缓冲液=1∶7的比例加入0.1 mol/L PBS缓冲液（pH 7.0）混合。冰浴匀浆后加入100 μL氯仿混匀；4 ℃冰箱中静置10 min；14 000 r/min低温离心15 min（2次），取上清液，分装，用于电泳分析或放入-80 ℃超低温冰箱里保存备用。
1.2.2 电泳与染色 按照文献[9]的方法进行聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳，浓缩胶浓度为4%，分离胶浓度为7.5%。电极缓冲液为Tris-Gly（pH 8.3）。加样前50 V电压下预电泳30 min，预电泳结束后每个加样孔加样15 μL。指示剂在浓缩胶时电泳电压为80 V，指示剂完全进入分离胶后电压升高至120 V，电流为15 mA；在冰柜中保持4 ℃进行电泳。待指示剂距凝胶底端2 cm处时停止电泳。取出凝胶用预冷去离子水洗净，放入染液进行染色。染液现配现用，染色流程参考有关方法[10-13]，稍作改进。
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